lunes, 29 de agosto de 2011



 












EXPERIMENTO 2

                    PUNTO ISOELECTRICO DE AMINOACIDOS Y PROTEÍNAS




OBJETIVOS:

  •           Determinar los pKa de un aminoácido polar con carga y un aminoácido no polar, mediante titulación con álcali.

  •           Estimar el punto isoeléctrico de los aminoácidos polares y no polares del gráfico de pH vs volumen de base.
  •            Determinar el punto isoeléctrico de una proteína mediante  la técnica de precipitación.

MARCO TEORICO

El punto isoeléctrico es el pH al que una sustancia anfótera tiene carga neta cero. El concepto es particularmente interesante en los aminoácidos y también en las proteínas. A este valor de pH la solubilidad de la sustancia es casi nula. Para calcularlo se deben utilizar los pKa.
Las moléculas complejas, tales como las proteínas, se combinan con los iones hidrógeno y con otros iones presentes en la disolución, dando lugar a la carga neta de la molécula. A la concentración de iones hidrógeno, o al pH, para el cual la concentración del ion híbrido de una proteína es máxima y el movimiento neto de las moléculas de soluto en un campo eléctrico es prácticamente nulo, se le denomina punto isoeléctrico.
Los aminoácidos pueden existir como sal interna, llamada zwitterión. Esto ocurre porque un electron del oxigeno del grupo carboxilo es atraído por el grupo amino NH2(ya que a al nitrogeno le sobraban dos electrones de valencia)que está en posición alfa y quedando este como grupo amoníaco NH3+.
El pI de los a-aminoácidos monoamino-monocarboxílicos, siempre está cercano a pH = 6. Este valor lo podemos calcular con la siguiente ecuación:
 El pI de los á-aminoácidos monoamino-dicarboxílicos se encuentra a un pH intermedio entre los valores de pKa de los grupos carboxílicos y en el caso de los á-aminoácidos diamino-monocarboxílicos entre los valores de pKa de los grupos amino.
Los puntos isoeléctricos proporcionan información útil para razonar sobre el comportamiento de los aminoácidos y proteínas en solución. Así, la presencia de grupos ionizables en éstas moléculas tiene importantes consecuencias sobre la solubilidad.
Los aminoácidos y las proteínas son menos solubles en su punto isoeléctrico si las demás condiciones permanecen iguales. Esto se debe a que los iones dipolares no presentan carga neta y cristalizan en forma de sales insolubles a ese pH.


MATERIALES

PIPETAS
SOPORTE

















MATRACES


PINZAZ PARA BURETAS













 

BURETA



PONTECIOMETRO


















REACTIVOS

Reactivo
Toxicidad

Acido Glutamico
Irritación en la piel Evite el contacto con la piel
Cancerígeno No


Glicina
Irritación a los ojos: poco irritante
Sensibilización: no presenta
Toxicidad crónica: no carcinogénico
Teratología: no presenta riesgos
Reproducción: no tóxico

Acido Clorhídrico
El ácido clorhídrico y concentraciones altas de gas, son altamente corrosivos a la piel y membranas Mucosas
Hidróxido de Sodio
Inhalación: Corrosivo.
Piel: Corrosivo. Enrojecimiento, graves quemaduras cutáneas.
Ojos: Corrosivo. Enrojecimiento, dolor, visión borrosa
Etanol al 95%




Ojos: Causa irritación.
Ingestión: Grandes cantidades pueden causar náuseas y vómito, dificultad para respirar.
Piel: Puede causar irritación
Tras absorción: de grandes cantidades causa borrachera, vértigo, narcosis, parálisis respiratoria.

Éter
Efectos por inhalación:
No se conocen efectos toxicológicos causados por este producto.




DISEÑO EXPERIMENTAL

PARTE A:



PARTE B:



jueves, 25 de agosto de 2011






















Experiencia # 1
Preparación de Soluciones Amortiguadoras


Objetivos: 
  • Preparar experimentalmente diferentes soluciones amortiguadoras.
  • Determinar el pH de las soluciones anteriormente preparadas. 
  • Establecer la relación entre el pH y un amortiguador.

 

Introducción
Las soluciones amortiguadoras, también conocidas como muelles buffer o tampón, son disoluciones que por el agregado de cantidades moderadas de ácidos o bases fuertes mantienen prácticamente constante el pH. También se dice que una solución es amortiguadora, reguladora o tampón si la concentración de protones H+, es decir el pH de una solución no se ve afectada significativamente por la adición de pequeñas cantidades o volúmenes de ácidos y bases.


Materiales

VOLUMÉTRICO
POTENCIÓMETRO


















BALANZA
BURETA




















ESPÁTULA
VASOS QUÍMICOS

















PROBETAS
PAPEL PARAFILM














 Reactivos

Reactivos
Toxicidad



Fosfato de potasio Monobásico
Inhalación: Puede causar irritación del tracto respiratorio, tos y asfixia.
Ingestión: La ingestión de grandes cantidades puede causar nausea, vómito, cólicos, diarrea.
Contacto con los Ojos:  (irritante)
Contacto con la Piel: (Irritante)








Acido Cítrico
Inhalación: Irritación del tracto respiratorio, tos, estornudos y dificultad respiratoria
Irritación de la boca y tracto digestivo. Más de 10 gramos pueden causar dolor
de estómago y vómito
Ingestión: Irritación de la boca y tracto digestivo. Más de 10 gramos pueden causar dolor
de estómago y vómito
Piel: Irritación
Irritación y destrucción de los tejidos. Se puede producir daño severo de la
córnea resultando en pérdida de la visión
Ojos: Irritación y destrucción de los tejidos. Se puede producir daño severo de la córnea resultando en pérdida de la visión digestivo. El ácido cítrico no se acumula en el cuerpo

Citrato Trisodico
Por contacto ocular: irritaciones leves.
Por ingestión: Riesgo de: vómitos, trastornos del equilibrio electrolítico. Quemaduras en esófago y estómago.


Fosfato dibásico de Potasio
Inhalación: Posibles irritaciones en la nariz.
Contacto con La Piel: No hay reportes.
Contacto con los Ojos: Posibles irritaciones.
Ingestión: Baja toxicidad oral.



Hidróxido de Sodio
Inhalación: Corrosivo. Sensación de quemazón, tos, dificultad respiratoria.
Piel: Corrosivo. Enrojecimiento, graves quemaduras cutáneas, dolor.
Ojos: Corrosivo. Enrojecimiento, dolor, visión borrosa, quemaduras profundas graves











Acido Clorhídrico
Contacto con la piel: Sin perder tiempo, llevar al sujeto completamente vestido bajo la ducha. Retirar los zapatos, los calcetines, la ropa manchada, lavar la piel alcanzada con agua corriente. Médico de urgencia en todos los casos. Evitar enfriamiento (taparlo con una manta), procurar ropas limpias. Puede efectuarse un lavado posterior con solución de bicarbonato sódico.
Contacto con los ojos: Oftalmólogo de urgencia en todos los casos. Prever un transporte urgente hacia un centro hospitalario. Sin perder tiempo, enjuagar los ojos con agua corriente durante 15 minutos, manteniendo los párpados ampliamente abiertos. Administrar un colirio analgésico (oxibuprocaína) en caso de dificultad en abrir los párpados.
Ingestión: Médico de urgencia en todos los casos. Prever un transporte urgente hacia un centro hospitalario.
Si el sujeto está consciente, hacer enjuagar la boca, dar de beber agua fresca y no provocar el vómito.
Si el sujeto está inconsciente, aflojar su cuello y las ropas ajustadas, recostarlo sobre su lado izquierdo en posición lateral de seguridad, reanimación respiratoria y oxígeno en caso necesario. Evitar el enfriamiento (taparlo con una manta).
                                                              


Diseño experimental


Parte A:




Parte B:






Parte C: 


Parte D: